血培養(yǎng)是臨床微生物學(xué)實驗室最重要檢查之一,是從患者體內(nèi)采血,并將其裝入含有培養(yǎng)基的瓶中,以此來確定導(dǎo)致患者感染的微生物(細(xì)菌或真菌)是否已經(jīng)侵入患者的血液。它是診斷血流感染、菌血癥的金標(biāo)準(zhǔn)。
想要獲取準(zhǔn)確的血培養(yǎng)結(jié)果,需要臨床醫(yī)生、護(hù)理人員和檢驗科工作人員共同做好質(zhì)量控制。下面就提供一份詳細(xì)完整的關(guān)于血培養(yǎng)操作過程指南。
一:血培養(yǎng)的送檢指征是什么?
懷疑患者存在菌血癥、敗血癥等血流感染時必須送檢血培養(yǎng),其主要指征如下:
1.不明原因的發(fā)燒(>38.5℃)或體溫低于36 ℃
2.WBC增多( >10X109/L)或粒細(xì)胞減少
3.寒顫
4.血壓降低
5.嚴(yán)重的局部感染(腦膜炎、心內(nèi)膜炎、肺炎、腎盂腎炎、腹部術(shù)后感染)
6.血小板減少,皮膚粘膜出血
7.炎癥反應(yīng)參數(shù)如C反應(yīng)蛋白、降鈣素原(PCT)、1,3-β-D-葡聚糖(G試驗)升高等。
最佳采集時間盡量在患者寒顫或發(fā)熱初期采血,盡可能在患者使用抗生素前完成采集。
二:采集幾套血培養(yǎng)合適?
1.成人在不同部位采集2-3套血培養(yǎng),(需氧、厭氧各一瓶為一套)。先注入需氧瓶,然后剩余的注入?yún)捬跗績?nèi)。
2.嬰幼兒在不同部位采集2套血培養(yǎng),(以提高病原菌檢出率和判斷有無污染菌,只需做需氧培養(yǎng),特殊情況才做厭氧培養(yǎng))。
注意:一次穿刺采血算一套,采集第二套應(yīng)從另外的穿刺點獲取。另外,由于抗生素開始治療后,血液中的細(xì)菌并不能立即被清除,因此5天內(nèi)無需重復(fù)采集。
三:規(guī)范的血培養(yǎng)采集流程圖
血培養(yǎng)因采用無菌體液方法采集,宜單獨采集,若與其他檢測項目同時采集,應(yīng)先采血培養(yǎng)瓶,避免污染造成假陽性情況。
成人采血量8-10ml/瓶,嬰幼兒1-5ml/瓶(嚴(yán)格無菌操作,不允許在皮膚消毒后用手接觸靜脈)。
血液注入血培養(yǎng)瓶后輕搖瓶身,做好標(biāo)記 → 立即送檢(切忌將培養(yǎng)瓶冷藏或冷凍)
四:關(guān)于血培養(yǎng)的采血量
1.采血量是影響靈敏度最關(guān)鍵的因素。每瓶應(yīng)采血8~10ml,兒童患者因為血液中病原菌濃度較高,血培養(yǎng)量無需等同于成人,但也推薦采血量每瓶不少于2ml。
2.成人一份標(biāo)本兩個培養(yǎng)瓶(需氧+厭氧),每瓶8-10ml。
3.兒童一般只需采集需氧瓶,每瓶2-5ml。
根據(jù)文獻(xiàn)統(tǒng)計每增加1ml血液,陽性率提高3%-5%
五:血培養(yǎng)的孵育時間
1.CLSI推薦全自動系統(tǒng)只需孵育5天。
2.90%的陽性標(biāo)本可在12h內(nèi)被檢出,36h內(nèi)可檢測出99%的陽性標(biāo)本。3-5天后陽性者多為污染菌。即便致病菌和污染菌在培養(yǎng)時間上存在差異,但專家建議,血培養(yǎng)陽性時間不應(yīng)作為鑒別污染菌和致病菌的標(biāo)準(zhǔn)。
3.與孵育7天相比,只有0.3%的陽性血培養(yǎng)在5天內(nèi)不能被檢出。設(shè)定5天為孵育周期是最具有性價比的。
六:血培養(yǎng)的報告制度
微生物實驗室針對血培養(yǎng)檢驗結(jié)果周期較長,患兒病情變化快,專門制定了一套血培養(yǎng)實驗結(jié)果報告制度,目的就是為臨床及時提供有價值的信息。
1.連續(xù)三日初步無菌報告:每日通過系統(tǒng)發(fā)出連續(xù)三日培養(yǎng)結(jié)果陰性的報告。不作為正式報告,僅供臨床參考。
2.陽性初報(報陽第一天):電話通知具體管床醫(yī)生,告知患兒姓名,報陽日期時間,革蘭氏染色特性。
3.陽性初報(報陽第二天):根據(jù)陽性血培養(yǎng)轉(zhuǎn)種后生長的菌落形態(tài)和染色及氧化酶和觸酶的結(jié)果,初步鑒定細(xì)菌的種屬,同時若有初步藥敏結(jié)果,先給臨床提供參考用藥。
4.正式報告(報陽第三天):書面報告鑒定細(xì)菌的種屬結(jié)果和藥敏結(jié)果。同時每日匯總發(fā)出連續(xù)五日培養(yǎng)結(jié)果陰性的報告。
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